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  • 杏园qPCR引物常见问题


    Q&A
    1.    引物发货周期是多久?
    一般7±2天。
    2.    你们提供引物序列吗?
    商业化的引物是不提供引物序列的,您发表文章的时候可以采取引用产品货号的方式。如下面的这篇论文。
    Biochim Biophys Acta. 2013 Mar;1832(3):391-9.

    3.    你们提供的引物一对是什么意思,有多少量?浓度是多少?
    引物一对指包含待测基因的上下游引物混合工作液。
    我们引物产品有不同规格,分别是针对20ul反应体系的200次反应和1000次反应的量。
    杏园生物的每条引物终浓度在0.1-1uM(工作液浓度是2-2uM),都是优化过的,您只需要按照说明书上的加量即可。
    4.    你们提供的引物有哪些物种的?
    人,小鼠和大鼠的mRNA的qPCR引物,我们都有。针对外显子测序的,我们现在仅仅提供人的引物。
    5.    你们的引物采用的是什么纯化方式?
    我们的引物全部都是是采用Page纯化,但是因为加入了去除盐分的步骤,所以更适合qPCR实验。
    6.    有些公司也可以帮忙设计引物,你们有什么优势?
    我们的引物全部都是经过验证的,做过扩增效率和引物特异性的检测。保证扩增效率在95%到105%之间,PCR产物条带单一。
    7.    相比较文献里引物,你们有什么优势?
    文献里的引物有很多其实都是不好用的,而我们的引物全部都是经过验证的,做过扩增效率和引物特异性的检测。保证扩增效率在95%到105%之间,PCR产物条带单一。
    8.    贵单位引物的Tm值是多少?
    请参考每条引物的使用说明书
    9.    产物长度是多少?
    产物长度我们一般控制在70-150bp。
    10. 关于保存温度
    常温运输,短期在4度保存也没关系,拿到后分装放到-20度保存,保质期半年。
    11. 引物一般设计在什么位置?
    我们一般将引物设计在3’-UTR区。因为降解是从5’UTR区开始的,3’端能更好的保留。
    12. qPCR引物验证用的什么标本?
    我们用的是多组织混合抽提物,以减少组织特异性表达的影响。




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