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    microRNA是一类小分子非编码RNA,广泛受到研究人员的关注。近年来,越来越多的研究证实microRNA作为癌症及其他多种疾病的生物标志物,对疾病研究有重要意义。但由于microRNA小分子短片段的特征,使其研究具有相当的挑战性。杏园生物的microRNA 检测系统,可依次实现广谱筛选、功能研究和精准检测,力求满足您的各种研究需求,成为您microRNA研究的最好伙伴。
     
    筛选至验证的一站式研究工具
    - 同时检测人、小鼠、大鼠的700多个较高表达丰度或已知功能的microRNA PCR芯片
    - 可选择现有的功能分类microRNA PCR芯片,或定制microRNA PCR芯片
    - 可用于Biomarker筛查或microRNA测序后的扩大样品量PCR验证
     
    精准而简便的一体化检测系统
    - 高重复性,无需担心芯片批次差异和假阳性
    - 高灵敏度,适用于微量样品和特殊样品,如血清、血浆、exosome、石蜡、显微切割样本等
    - 高特异性,LNA修饰的特异PCR引物和RT反应技术,可有效识别单碱基差异和3’末端变化

    上海杏园生物在microRNA芯片研究领域有多年的技术服务经验。公司采用全球领先的microRNA检测平台,具备高重复性、高灵敏度、高特异性等优势。公司提供的服务内容涵盖实验设计、样品处理、芯片检测,并为您提供符合文献发表要求的数据报告。
     
     
    杏园生物microRNA PCR芯片技术服务项目

    - microRNA PCR表达谱芯片
    同时检测人、小鼠、大鼠的700多个microRNA
    - 血清/血浆microRNA PCR芯片
    - 肿瘤相关microRNA PCR芯片
    o   乳腺癌相关microRNA芯片
    o   前列腺癌相关microRNA芯片
    o   脑癌相关microRNA芯片
    o   卵巢癌相关microRNA芯片
    o   抑癌microRNA 芯片
    - 其他功能分类microRNA PCR芯片
    o   糖尿病相关microRNA芯片
    o   干细胞microRNA芯片
    o   细胞分化和发育相关microRNA芯片
    o   炎症反应和自身免疫应答相关microRNA 芯片
    o   T细胞和B细胞活化相关microRNA芯片
    o   凋亡相关microRNA芯片
     
    - 订制microRNA PCR芯片

     

    研究实例
    研究摘要
    MicroRNAs have been globally profiled in cancers, usually by microarrays, but there is pooragreement between studies in even the same cancer, and very few targets of the microRNAs havebeen validated. To overcome the lack of reproducibility, we used two genomic strategies formicroRNA profiling, next generation sequencing and Locked Nucleic Acid miRNA microarrays,and verified the concordant changes by quantitative RT-PCR. miR-125b and members of miR-99family (miR-99a, -99b, -100) were down-regulated in all three assays in the more advancedprostate cancer cell line C4-2 relative to the parental LNCaP cells. Similar decrease was seen inthe transformed  prostate cancer cell line WPE1-NB26 compared to its untransformed parent,RWPE1. Interestingly, all four miRNAs were also down-regulated in human prostate tumor tissuecompared to normal prostate. Transfection of miR-99a, -99b or -100 inhibited the growth ofprostate cancer cells and decreased the expression of prostate-specific antigen (PSA) indicatingtheir potential r ole as tumor suppressors.
    To identify validated targets, we combined the computational prediction of potential targets, microarrays to detect mRNAs down-regulated bymiRNAs and an analysis of the loading of mRNA on polyribosomes. We validated three directtargets of the miR-99 family: chromatin remodeling factors SMARCA5 and SMARCD1 and akinase involved in signal transduction, mTOR and demonstrated that the expression of PSA ispost-transcriptionally regulated by miR-99 family at least partially through repression ofSMARCA5.

    microRNA已经通过microarray的方法在癌症中被广泛研究,但是即使是同一种癌症的不同研究结果之间的一致性都比较差,而且这些microRNA的靶基因也很少被验证。为了克服重复性的缺陷,我们使用两种基因组学的策略来研究microRNA,分别是下一代测序技术和Locked Nucleic Acid miRNA microarray,并用定量RT-PCR验证了两者结果中一致的变化。前列腺癌细胞C4-2相对于LNCap细胞,其miR-125b和miR-99家族的成员(miR-99a,-99b,-100)在上述三种实验结果中都是表达量下调。转化的前列腺癌细胞系WPE-NB26相对于未转化的细胞系RWPE1也发现了类似的下调。有趣的是,上述四种miRNA在人来源的前列腺癌组织中(相对于正常组织)也是表达下调。转染miR-99a,-99b或者-100会抑制前列腺癌细胞的生长以及降低前列腺特性抗原(PSA)的表达,这些表明miR-99a,-99b,-100作为抑癌因子的潜在可能。本研究联合使用计算机辅助预测,microarrays筛选被miRNA下调的mRNA以及分析多聚核糖体上mRNA载量的方法来发现和验证靶基因。结果我们发现并验证了miR-99家族的三个直接靶基因:染色质重塑因子SMARCA5,SMARCD1和在信号转导通路中发挥作用的激酶mTOR,并且发现miR-99家族部分通过抑制SMARCA5的表达来转录后调控PSA的表达。
     
    研究思路


     
     
     
    结果展示



    (Cancer Res. 2011 February 15; 71(4): 1313–1324.)

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    所有的原始数据的广泛的Excel文件也包括在内。最后报告还作为链接到我们的安全的网络服务器。科学跟进的情况下能够组织你有问题要你的最终报告,或想进一步讨论结果的意义。
     
    miRNA的PCR质控报告包括:
    • RNA样品质量控制(QC)的报告
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