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多重PCR (Multiplex PCR)
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产品详情送样要求研究思路
多重PCR (Multiplex PCR) 服务
单管同时检测多个靶标 · 高特异性 · 高通量
多重PCR是一种在同一反应体系中加入多对引物，同时扩增多个核酸片段的技术。通过对引物组合、扩增体系及退火温度的系统优化，实现在单一PCR管中高效、特异地检测多个目标序列。广泛应用于病原体鉴定、基因分型、突变检测及遗传病筛查等领域。
核心优势 · 为什么选择杏园多重PCR服务
高通量 · 高效率
单反应管同时检测2~50个靶标，显著节约样本、试剂与时间，适合大样本量筛查和Panel检测。
精准引物设计
基于多重PCR专用算法进行引物设计，避免引物二聚体及非特异性扩增，确保各靶标扩增均一性。
高特异性和灵敏度
通过体系优化、热启动酶及增强剂，可检测低至1 ng DNA模板中的稀有靶标。
灵活检测平台
兼容普通PCR（电泳检测）、qPCR（荧光通道多重）、毛细管电泳及NGS建库等多平台输出。
实现2-50重靶标检测 均一性CV<15% 适用于复杂样本（FFPE、cfDNA等）
标准化多重PCR服务流程
1
需求确认
靶标序列/数量评估
2
引物设计与合成
多重PCR专用算法
3
体系优化与验证
退火温度/酶浓度滴定
4
样本检测
多重PCR扩增
5
产物分析
电泳/qPCR/测序
6
数据交付
图谱+详细报告
技术规格与参数
| 多重检测重数 | 2 ~ 50 重（依据靶标复杂度和样本质量调整） |
|---|---|
| 样本类型 | gDNA、cDNA、FFPE DNA、cfDNA、微生物DNA等 |
| 样本起始量 | ≥1 ng DNA（常规建议5-10 ng） |
| 引物设计策略 | 多重引物设计算法 + Tm值统一化（58-62℃） |
| 扩增均一性 | CV值＜15%（荧光强度归一化） |
多重引物设计 · 关键质量控制
多重引物设计原则
各引物Tm值接近（相差≤2℃）；避免引物间3'端互补；产物长度梯度化便于区分；针对保守区设计，兼顾SNP位点。
体系优化策略
调整引物浓度比例、Mg²⁺浓度、退火温度梯度、使用多重PCR增强剂及热启动酶，**限度提升扩增均一性。
验证流程
先验证单对引物特异性 → 两两组合测试交叉干扰 → 最终全重数体系验证，保证结果可靠。
质量控制交付
提供每重引物单管扩增对照图、多重体系代表性样本质控峰图/条带图、测序验证原始数据。
主要应用方向
病原体检测
呼吸道病毒、肠道致病菌、HPV分型、血流感染等多重鉴定，单管覆盖多种病原。
基因分型与突变检测
SNP分型、基因缺失/插入突变、耐药突变位点并行检测。
遗传病筛查
单基因病多位点快速筛查（如地中海贫血、SMA等）。
转基因检测
多种转基因元件（35S、NOS、Bar等）同时筛查。
法医鉴定
STR多重分型、性别鉴定与个体识别。
农业育种
作物/畜禽抗病及性状相关基因的快速多重筛选。
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