磷酸化抗体芯片
Full Moon BioSystems
磷酸化抗体芯片 服务
通过将数百至上千种特异性抗体共价固定在带有3D聚合物涂层的优质玻璃表面，实现对多种信号通路和生物过程相关蛋白质的磷酸化状态进行同时检测。广谱分析、高特异、多物种适用。
广谱磷酸化分析能力
Phospho Explorer Antibody Array：包含1318种磷酸化和位点特异性抗体，覆盖超过30条信号通路，适用于广泛的磷酸化谱分析和筛选。
Pathway Phospho Arrays：针对特定研究领域（如PI3K/AKT、MAPK、mTOR、p53等超过25条通路）提供聚焦分析，包含与关键信号通路高度相关的抗体。
每张芯片包含两块相同的阵列玻片，可同时分析两个样本（如对照样本和处理样本），便于直接比较。
高特异性和灵敏度
芯片包含位点特异性和磷酸化特异性抗体，能够分别检测特定磷酸化位点（酪氨酸、丝氨酸和苏氨酸）的磷酸化状态以及总蛋白水平。抗体固定在3D聚合物涂层上，优化了结合效率，保证低背景噪声和高信号清晰度。
多物种适用性
适用于人类、小鼠和大鼠的细胞裂解液、组织裂解液、血清样本或培养基等多种样本类型。
内置质控
每张芯片包含阳性和阴性对照，以及多个重复点，确保结果的准确性和可靠性。
Phospho Explorer Array
广谱磷酸化筛选芯片，覆盖超过30条信号通路，包含1318种磷酸化位点特异性抗体。适用于全局磷酸化图谱绘制、发现新的磷酸化调控靶点。
Pathway Phospho Arrays
针对PI3K/AKT、MAPK、mTOR、p53、NF-κB等超过25条关键信号通路提供聚焦磷酸化检测，抗体高度特异且与通路强相关，适合验证特定信号机制。
| 芯片平台 | Full Moon BioSystems 磷酸化抗体芯片 (基于玻璃的ELISA体系) |
|---|---|
| 芯片固定技术 | 共价结合，3D聚合物涂层，提升抗体结合效率、降低背景噪声 |
| 检测指标 | 位点特异性磷酸化抗体 (pTyr, pSer, pThr) + 总蛋白抗体 |
| 芯片规格 | 标准玻片格式，每张芯片含两块相同的阵列玻片(可同时分析两个样本) |
| 通路覆盖 | Phospho Explorer：30+ 信号通路；Pathway 系列：≥25条特定通路 |
| 样本兼容性 | 人/小鼠/大鼠细胞裂解液、组织裂解液、血清、培养基等 |
| 质控体系 | 包含阳性和阴性对照、多个重复点，保证数据可靠性 |
| 交付内容 | 原始荧光信号值、标准化磷酸化水平、差异分析、热图及通路富集报告 |
广谱磷酸化筛查
Phospho Explorer芯片用于发现异常磷酸化事件，探索未知信号串扰。
肿瘤信号网络
解析激酶-底物关系，挖掘耐药标志物与药物敏感性磷酸化特征。
神经退行性疾病
分析tau蛋白磷酸化谱、α-synuclein修饰及关键信号改变。
药物靶点验证
激酶抑制剂/激动剂处理后定量磷酸化变化，绘制作用图谱。
请将所有样本装在1.5毫升或2.0毫升带螺旋盖的离心管中寄送。
细胞沉淀
500万个冷冻细胞沉淀
细胞裂解液
总蛋白量不少于400微克，浓度为2微克/微升或更高
重要提示：仅使用PBS清洗培养基/细胞。为保护蛋白活性，避免使用胰蛋白酶或其他试剂。细胞裂解可采用常用裂解协议进行。可接受的裂解缓冲液包括Full Moon BioSystems的蛋白提取缓冲液（货号：EXB050）、Pierce的RIPA缓冲液或其他常用缓冲液。应避免或限制使用Tris和去污剂。样本中Tris浓度不得超过50毫摩尔，SDS浓度不得超过0.1%，非离子型去污剂浓度不得超过1%。可在裂解缓冲液中添加蛋白酶和/或磷酸酶抑制剂（如Roche的抑制剂混合物）以保持蛋白活性。
贴壁细胞：移除培养基，用冰冷的1X PBS（4℃）清洗培养物3-5次。移除残留的PBS，加入裂解缓冲液。用刮刀分离细胞，将细胞及剩余上清液转移至干净的螺旋盖微量离心管中。继续进行细胞裂解。详细裂解协议请参考所用裂解缓冲液的制造商说明。将最终裂解液转移至透明离心管。
悬浮细胞：将含细胞的培养基转移至干净离心管中。以500 x g在4℃离心2分钟沉淀细胞。完全移除培养基，小心不要扰动细胞。用冰冷的1X PBS清洗沉淀，随后离心。重复此步骤三次，确保彻底移除培养基。丢弃上清液。继续进行细胞裂解。详细裂解协议请参考所用裂解缓冲液的制造商说明。将最终裂解液转移至透明离心管。
冷冻组织
75毫克冷冻组织
组织裂解液
总蛋白量不少于400微克，浓度为2微克/微升或更高
用冰冷的1X PBS（4℃）涡旋清洗组织。移除并丢弃PBS。重复3-5次。
重要提示：确保组织中的血液被完全移除。如有必要，增加PBS清洗次数。当血液完全移除后，组织应呈白色，PBS清洗液应清澈无色。组织中残留的任何血液会进入裂解液，导致芯片出现高背景。
组织裂解可采用常用裂解协议进行。可接受的裂解缓冲液包括Full Moon BioSystems的蛋白提取缓冲液、Pierce的RIPA缓冲液或其他常用缓冲液。应避免或限制使用Tris和去污剂。样本中Tris浓度不得超过50毫摩尔，SDS浓度不得超过0.1%，非离子型去污剂浓度不得超过1%。可在裂解缓冲液中添加蛋白酶和/或磷酸酶抑制剂（如Roche的抑制剂混合物）以保持蛋白活性。
血清或血浆
20微升血清/血浆
应用场景
Full Moon BioSystems的磷酸化抗体芯片广泛应用于以下领域：
细胞信号通路研究：分析关键通路中蛋白质的磷酸化变化，如AKT、MAPK、NFkB等。
生物标志物筛选：比较正常样本与处理或疾病样本，识别候选生物标志物。
疾病机制探索：适用于神经退行性疾病（如阿尔茨海默病、帕金森病）、癌症、糖尿病等研究，揭示异常磷酸化信号的作用。
药物开发：评估药物对特定磷酸化位点或通路的影响。