RNA提取
RNA提取 （总RNA纯化） 服务
提供从各类生物样本中提取高纯度、高完整性总RNA的专业服务。采用优化的裂解及纯化技术，有效去除蛋白质、多糖及基因组DNA污染，确保RNA质量满足RT-PCR、qPCR、Northern blot、RNA-Seq等下游实验的严苛需求。
高纯度 & 高完整性
A260/280 1.9-2.1，A260/230 ≥1.8；RIN值≥7（真核生物组织/细胞），满足RNA-Seq等应用。
全类型样本覆盖
细胞、组织、血液、FFPE、植物、微生物、外泌体、血清/血浆等。
有效去除基因组DNA残留
柱上DNase I处理或磁珠法专用去DNA步骤，确保qPCR无假阳性扩增。
严格质控体系
Qubit荧光法 + Nanodrop 纯度分析 + Agilent 2100 完整性评估，提供详细质控报告。
样本接收/登记
液氮或RNAlater保存评估
组织/细胞裂解
胍盐/酚-氯仿或磁珠裂解
去除基因组DNA
DNase I 柱上/柱下处理
结合/洗涤/洗脱
磁珠或离心柱纯化
RNA质检
浓度/纯度/完整性(RIN)
交付报告
-80℃存储+质控文件
| 样本类型 | 推荐起始量 | 预期得率范围 |
|---|---|---|
| 培养细胞 | 1×10⁵ - 1×10⁷个 | 1-20 μg |
| 动物组织（肝/脑/肾等） | 10-30 mg | 5-50 μg |
| 全血（新鲜） | 200-500 μL | 2-10 μg（需红细胞裂解） |
| FFPE切片/蜡卷 | 2-8 片（5-10 μm） | 0.1-3 μg（高度片段化） |
| 植物组织（多糖/多酚） | 20-50 mg | 2-20 μg（专用提取法） |
| 外泌体/血清/血浆 | 200 μL-1 mL | 10-200 pg（微量游离RNA） |
| 细菌/微生物 | 1-5 mL 菌液 | 2-30 μg |
| 土壤/粪便（环境RNA） | 250-500 mg | 0.5-10 μg（需去除腐殖酸） |
| RNA质控标准 | |
|---|---|
| 浓度测定 | Qubit RNA HS/BR 或 Nanodrop 分光光度法 |
| 纯度评估 | A260/280 = 1.9-2.1；A260/230 ≥ 1.8 |
| 完整性评估 | Agilent 2100 Bioanalyzer (RIN值)，真核细胞/组织RIN≥7，原核/FFPE提供完整分析 |
| gDNA残留检测 | qPCR / 无逆转录对照验证 |
| 交付形式 | 无核酸酶水或TE缓冲液，1.5mL管/96孔板，-80℃冻存运输 |
| 周转周期 | 常规3-6个工作日（视样本类型及通量） |
FFPE RNA提取
专用脱蜡及去交联流程，高效回收小片段RNA，qPCR及RNA-seq适用。
多糖/多酚植物组织
改良裂解液及CTAB法结合离心柱，有效去除次生代谢物抑制。
微量/游离RNA
血浆/外泌体/血清RNA提取，采用载体RNA共沉淀，提高低丰度RNA回收效率。
微生物/环境RNA
强裂解及腐殖酸去除技术，适配下游反转录及宏转录组。
RT-PCR / qPCR
高纯度RNA提供稳定反转录效率及重复性。
RNA-Seq (转录组测序)
RIN≥7满足链特异性文库及全长转录本构建要求。
基因芯片
高完整性RNA保障cDNA标记及杂交信号强度。
Northern blotting
高分子量RNA完整性满足电泳及转膜。
cDNA文库构建
无残留gDNA及杂质，确保文库质量。
单细胞RNA测序
提供高质量原代细胞悬液的RNA提取及完整性评估。
一、样本量要求
• 动物组织：≥ 100mg，新鲜取样，立即冻存
• 植物组织：≥ 200mg，避免木质化、多糖多酚样本
• 全血样本：≥ 500μL，专用RNA保存管保存
• 细胞样本：≥ 2×10⁶个，Trizol/RNA保护剂浸泡
• FFPE石蜡：≥ 8片（10μm），避免过度固定
二、保存与运输
• 所有样本：取样后立即液氮速冻，-80℃保存
• 全程干冰运输，严禁反复冻融
• 推荐使用Trizol或RNA保护剂浸泡样本
• 样本标记清晰，密封无泄漏