数字PCR(dPCR)检测服务
数字PCR (dPCR) 服务
数字PCR是一种基于单分子计数的绝对定量技术，将PCR反应体系分散至数万个微滴中，通过终点荧光信号读取“阳性/阴性”比例，结合泊松分布直接计算靶标拷贝数。无需标准曲线，具有超高灵敏度、精准度和抗抑制剂能力，特别适用于低丰度核酸、稀有突变及拷贝数变异检测。
绝对定量 · 无需标准曲线
基于泊松分布统计阳性微滴比例，直接输出拷贝数/μL，不依赖Ct值或标准品，排除扩增效率干扰。
超高灵敏度 & 精准度
检测极限低至0.001%突变丰度，分辨率可达0.1倍拷贝数差异，远超qPCR，适合痕量样本及稀有事件检测。
抗抑制剂能力优异
微滴分区隔离有效降低PCR抑制剂影响，适用于FFPE、血浆、粪便等复杂样本。
双平台灵活选择
QX200™ (经典平台，2万微滴/样本) / QX600™ (新一代六色检测，高通量，最高100bp分辨率)，适配不同项目需求。
| 平台型号 | QX200™ 微滴数字PCR系统 | QX600™ 微滴数字PCR系统 |
|---|---|---|
| 微滴生成方式 | 自动化微滴生成仪 | 集成式自动化微滴生成/读取 |
| 每样本微滴数 | ~20,000个 | ~20,000个 (最高精度仍保持) |
| 荧光检测通道 | 双通道（FAM/HEX） | 六通道（FAM/HEX/VIC/CY5/等六色） |
| 多重检测能力 | 单次1-2重 | 单次至高6重 (同一样本同时检测6靶标) |
| 通量 | 96孔板，手动操作较多 | 更高自动化，集成度提升 |
| 适用场景 | 成熟经典，2靶标以内绝对定量 | 复杂多重、多靶标联合、高样本通量 |
样本制备
核酸提取/纯化、浓度测定
引物/探针设计与验证
针对靶标优化，确保特异性
微滴生成
QX200/QX600 自动生成2万微滴
PCR扩增
标准热循环程序
微滴读取与数据分析
荧光信号采集+泊松分布计算
交付报告
拷贝数浓度+分析图表
| 核心技术原理 | 微滴分区 + 终点泊松分布统计 | |
|---|---|---|
| 检测平台 | Bio-Rad QX200™ / QX600™ 微滴数字PCR系统 | |
| 灵敏度 | 低至单拷贝/反应，突变丰度检测下限0.001% | |
| 动态范围 | 5个数量级 (约1-100,000 拷贝/μL) | |
| 重复性 | CV<10% (低拷贝样本)，CV<5% (中高拷贝样本) | |
| 多重检测能力 | ||
| 样本类型 | ||
| 样本起始量 | 最低0.5 ng DNA，建议1-10 ng/反应 | |
| 交付内容 | 原始数据(.csv)、拷贝数浓度(result sheet)、微滴散点图、一维/二维图、实验报告 | |
| 周期 | 样本接收后5-7个工作日（常规单靶标项目） | |
超低频突变检测
液体活检（ctDNA）早期筛查、微小残留病(MRD)检测，罕见突变丰度精确量化。
拷贝数变异(CNV)分析
基因扩增/缺失精确鉴定，分辨率0.1倍差异，比qPCR更可靠。
病毒/病原体绝对定量
HBV、HIV、HPV、CMV等载量检测，不依赖标准曲线，抗抑制剂能力强。
基因编辑&转基因检测
CRISPR敲入/敲除效率评估、转基因拷贝数绝对测定。
基因表达绝对定量
转录本拷贝数测定、miRNA/lncRNA精确定量，适用于低丰度靶标。
NGS结果验证
验证NGS检测到的低频变异、CNV及结构变异，提供正交验证数据。
标准品/参考品定值
绝对定量为官方标准品、质控品赋值，用于实验室能力验证。
环境/食品微生物检测
复杂基质中微量病原微生物绝对定量。
一、样本类型
• 组织样本：新鲜/冻存组织 ≥ 20mg，FFPE石蜡组织优先
• 细胞样本：贴壁/悬浮细胞 ≥ 1×10⁵个，微量样本可接收
• 全血/血浆：≥ 200μL，EDTA抗凝，禁用肝素，推荐血浆
• RNA样本：体积 ≥ 10μL，浓度 ≥ 20ng/μL，微量样本可检测
• DNA样本：体积 ≥ 10μL，浓度 ≥ 10ng/μL，可接受降解样本
二、样本保存运输
• 组织/细胞/血浆：-80℃保存，干冰运输，避免反复冻融
• FFPE石蜡切片：常温运输，避免高温融化
• 核酸样本：-20℃以下保存，冰袋/干冰运输
三、信息提供
• 样本名称、分组、目标基因/位点、物种信息
• 检测需求：绝对定量 / 突变检测 / 拷贝数分析
• 基因ID、序列或突变位点信息